一般情況下，我們都是先種細(xì)胞養(yǎng)過夜再轉(zhuǎn)染，這叫forward transfection，即使起始細(xì)胞量較低，細(xì)胞活性最好。

若轉(zhuǎn)染小rna，可同時(shí)進(jìn)行種板和轉(zhuǎn)染，即細(xì)胞懸液和轉(zhuǎn)染復(fù)合物混合在一起，放入細(xì)胞培養(yǎng)皿中。reverse transfection。但我試過了。細(xì)胞活性不如傳統(tǒng)。forward transfection好吧，這么多protocol建議添加更多的細(xì)胞。

如果是轉(zhuǎn)染dna，通常不建議這樣做，或者誠實(shí)forward，一天不差。

此外，lipo3000毒性并沒有想象的那么小，其他轉(zhuǎn)染試劑，如lipo2000，fugene沒有想象的那么大。但是換液還是需要的，最好6-8在一小時(shí)內(nèi)更換液體，否則細(xì)胞活性仍會(huì)降低。當(dāng)然，有些強(qiáng)細(xì)胞可能不怕，但我還沒有遇到過這么強(qiáng)的細(xì)胞。至少在我常用的細(xì)胞系中測(cè)試的幾種感染試劑使用一定量的流式。即使在感染6小時(shí)后更換液體，第二天也會(huì)有大約30%的細(xì)胞死亡。